Hektoen Enteric Agar Indicator Forex

Hektoen Enteric Agar Hektoen Enteric Agar (HE) é um meio seletivo e diferencial projetado para isolar e diferenciar membros da espécie Salmonella e Shigella de outras Enterobacteriaceae. Os sais biliares e os corantes azul de bromtymol e fuchsina ácida inibem o crescimento da maioria dos organismos Gram-positivos. A lactose, a sacarose e a salicina proporcionam carboidratos fermentáveis ​​para estimular o crescimento e diferenciação de entéricos. O tiossulfato de sódio proporciona uma fonte de enxofre. O citrato de amónio férrico proporciona uma fonte de ferro para permitir a produção de sulfureto de hidrogénio a partir de tiossulfato de sódio, que proporciona uma fonte de enxofre. O citrato de amónio férrico também permite a visualização da produção de sulfureto de hidrogénio por reacção com gás sulfureto de hidrogénio para formar um precipitado negro. Os ent�icos que fermentam um ou mais dos hidratos de carbono ir� produzir col�ias amarelas a cor de salm�. Os não-fermentadores produzirão colônias azul-esverdeadas. Os organismos que reduzem o enxofre ao sulfureto de hidrogénio produzirão colónias negras ou colónias azul-esverdeadas com um centro negro. A Klebsiella pneumoniae fermenta a lactose e produz crescimento de cor de salmão. Micrococcus luteus não cresce. As manchas brancas são cristais formados por um componente do meio que precipitou fora da solução quando as placas foram arrefecidas. Eles parecem um pouco como um contaminante, mas eles não interferem com o desempenho da mídia. Hektoen Enteric Agar (HE) é um meio de revestimento diferencial e seletivo para a cultura de patógenos entéricos. Um esforço para desenvolver um meio que fosse favorável ao crescimento de shigellae e inibidor da flora intestinal normal foi relatado por King e Metzger. A incorporação de maiores quantidades de peptona para neutralizar os efeitos inibidores dos sais biliares e a utilização de um novo sistema inibidor proporcionou as bases para o desenvolvimento de Hektoen Enteric Agar. Os autores relatam ainda a superioridade de HE Agar sobre SS Agar na recuperação direta ou indireta de shigellae de fezes ou espécimes de esfregaço retal e recomendam que substitua SS Agar no regime de placas de mídia utilizada para culturas de fezes. Um complexo de sais biliares é incorporado no meio para inibir o crescimento de organismos gram-positivos. A salicina de sacarose e quantidades maiores de lactose do que o habitual são incorporadas na HE para facilitar o reconhecimento de patógenos de fermentadores de lactose lentos. O sistema indicador de sulfureto de hidrogénio baseia-se no tiossulfato de sódio como fonte de enxofre com citrato de amónio férrico como indicador. Assim, as colónias negras representam o citrato de amónio ferroso negro precipitado. (A) Emulsionar a amostra de fezes em solução salina, se necessário. (B) Agitar fora do laço antes do streaking. (C) Utilize inóculo moderado para espalhar a placa HE Agar. (D) Se forem usados ​​swabs, enrole os swabs em um canto da placa e streak para o isolamento desta área. Incubar placas estriadas e inocular caldos de enriquecimento 18-24 horas a 35C. Quando o crescimento é aparente streak para HE Agar. Subcultura diretamente de caldos de enriquecimento. Streak RE Agar usando um loop de 3 mm e inóculo moderado. Exame de Placas: (a) Examinar as placas primárias HE 20-24 horas macroscopicamente. Examinar as placas subcultivadas a partir de caldos às 20-24 horas. (B) Selecionar colônias características de placas HE e realizar testes fisiológicos e sorológicos adicionais conforme necessário. Note que a morfologia colonial, observada macroscopicamente, é um auxílio presuntivo e não fornece informações para a especiação. HEKTOEN ENTERIC (HE) AGAR USO PREVISTO Hardy Diagnostics Hektoen Enteric (HE) Agar é um meio seletivo e diferencial usado para o isolamento e diferenciação de gram - Patógenos entéricos negativos. RESUMO King e Metzger desenvolveram HE Agar em um esforço para aumentar a recuperação de espécies de Salmonella e Shigella sobre o Agar de Salmonella-Shigella (SS) previamente formulado. (7) Este meio é particularmente útil no isolamento de espécies de Shigella. A presente formulação de HE Agar incorpora maiores quantidades de peptona para compensar o efeito inibitório dos sais biliares. Além disso, o desoxicolato de sódio foi eliminado e a quantidade de sais biliares reduzida. Os sais biliares permitem a natureza selectiva de HE Agar inibindo organismos gram-positivos. Os sais biliares podem também ser tóxicos para algumas estirpes gram-negativas. Salicina, sacarose e lactose são os carboidratos fermentáveis ​​presentes. Eles fornecem a diferenciação ideal de patógenos entéricos. Lactose e sacarose, em concentração aumentada, ajudam na diferenciação de patógenos entéricos de fermentadores lentos de lactose. O azul de bromotimol e a fuchsina ácida (Andrades) são adicionados como indicadores ácido-base. A adição de citrato de amónio férrico e tiossulfato de sódio permite a detecção de H2S, observada pela produção de colónias negras centradas. O tiossulfato de sódio serve como fonte de enxofre enquanto que o citrato de amónio férrico serve como indicador. HE Agar é actualmente recomendado como um dos vários meios de revestimento para a cultura de Enterobacteriaceae a partir de amostras de fezes. Isto é devido à sua natureza moderadamente selectiva, bem como à sua propriedade de diferenciação. FORMULA Ingredientes por litro de água desionizada: Peptic Digest of Animal Tissue pH final 7,7 / - 0,2 a 25ordmC. Ajustado e / ou complementado conforme necessário para atender aos critérios de desempenho. ARMAZENAMENTO E VIDA ÚTIL Armazenamento: No recibo armazene em 2-8ordmC. Os produtos não devem ser utilizados se houver quaisquer sinais de contaminação, deterioração ou se a data de validade tiver passado. O produto é leve e sensível à temperatura proteger da luz, calor excessivo, umidade e congelamento. PRECAUÇÕES PROCEDIMENTO Colheita de espécimes: O material infeccioso deve ser submetido diretamente ao laboratório sem demora e protegido de calor e frio excessivos. Se houver um atraso no processamento, a amostra deve ser inoculada em um meio de transporte apropriado e refrigerada até a inoculação. Consulte as referências listadas para obter informações sobre a coleta de amostras. (1-6) Modo de Utilização: O meio deve ser levado à temperatura ambiente antes da inoculação. Se o material estiver sendo cultivado diretamente de um cotonete, role o cotonete sobre uma pequena área da borda da superfície. Streak o inóculo para obter colônias isoladas. Um meio não seletivo também deve ser inoculado. Isso aumenta a chance de recuperação quando a população de organismos gram-negativos é baixa. Também fornece indicação de outros organismos presentes na amostra. Incubar as placas durante 18-24 horas a 35ordmC. Protegido da luz. Se negativo após 24 horas, incubar por mais 24 horas. INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS HE Agar é examinado para a morfologia colonial típica após a incubação. A fermentação de lactose, sacarose ou salicina resulta na produção de ácido que dá origem a colónias amarelo-alaranjado a salmão. As colónias de Salmonella e Shigella spp. São verdes a azul-verde na cor. Salmonella spp. Que produzem H 2 S aparecem como colónias azul-esverdeadas com centros pretos. Os produtores de H 2 S formam colónias centradas no preto na presença de citrato de amónio férrico e tiossulfato de sódio. Consulte as referências listadas para uma interpretação posterior do crescimento e outros testes de identificação para identificar o crescimento de organismos neste meio. (1-6) LIMITAÇÕES O crescimento cultural pode ser retardado ou inibido pela presença de agentes antimicrobianos na amostra. Além disso, os antimicrobianos podem alterar a aparência característica do organismo no meio. Recomenda-se que os caldos de enriquecimento seletivos (GN ou Selenite Cystine) sejam usados ​​em conjunto com meios de revestimento seletivo para otimizar o isolamento de patógenos entéricos. Os sais biliares no meio podem cristalizar ao longo do tempo. Eles aparecem como pequenas bolas de aranha-like dentro do meio e não afetam o desempenho. A cor de HE Agar pode mudar de verde para marrom durante a expedição. Isso é normal e não deve afetar o desempenho do meio. A colocação de placas em condições refrigeradas (2-8 ° C) após o recebimento durante a noite resultará no retorno do meio a uma aparência verde normal. Colónias de Proteus. Que pode ou não ser inibida, pode assemelhar-se Salmonella ou Shigella. A recuperação da maioria dos Shigella e muitos Salmonella spp. De espécimes de fezes sem conservação pode ser comprometida se atrasos de processamento exceder 2-3 horas. MATERIAIS NECESSÁRIOS MAS NÃO FORNECIDOS Não são fornecidos materiais e equipamentos microbiológicos padrão, tais como loops, outros meios de cultura, esfregões, varetas, incineradores e incubadoras, etc., bem como reagentes serológicos e bioquímicos. CONTROLE DE QUALIDADE